细胞自噬
发布时间 :2018-01-03
细胞自噬检测
       细胞自噬是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。
       自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。
       在荧光显微镜下采用GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬形成:利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了此技术。无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。
       LC3抗体对LC3-II亲和力,两种方法可结合使用。



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① 细胞:大于106

② 抗体


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① 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论)


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